供应大鼠雌激素受体(ER)ELISA Kit
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中雌激素受体(ER)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中雌激素受体水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入雌激素受体、生物素化的抗大鼠雌激素受体抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的雌激素受体呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板：一块（96 孔）
2. 标准品（冻干品）：2 瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10 分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20000 pg/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成20000
pg/mL，10000 pg/mL，5000 pg/mL ，2500 pg/mL，1250 pg/mL，625 pg/mL，312 pg/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL，临用前15 分钟内配制。
如配制1000 pg/mL标准品：取0.5ml 20000 pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液 A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液 B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液 A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A 1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul 检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液 B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100 稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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