供应人波形蛋白(VIM)ELISA Kit
本试剂盒仅供体外研究使用!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中VIM含量。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗VIM 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗VIM 抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中
的VIM 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板：一块（96孔）
2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为40 ng/ml，将其稀释为20 ng/ml 后，再做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)，分别稀释成20 ng/ml，10 ng/ml，5ng/ml，
2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。如配制10 ng/ml 标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 20 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml。
4. 检测稀释液A：1×10ml。
5. 检测稀释液B：1×10ml。
6. 检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl 检测溶液A加990μl 检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
11. 覆膜：5张
12. 使用说明书：1份
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