供应大鼠肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA Ki
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中SP-D 含量。
实验原理
用纯化的 SP-D抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的SP-D抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的SP-D呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、酶标板：一块（96 孔）
2、标准品（冻干品）： 2 瓶，请临用前15 分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10 分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为40 ng/ml，将其稀释为10 ng/ml 后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成10 ng/ml，5 ng/ml，2.5 ng/ml，1.25 ng/ml，0.625 ng/ml，0.312 ng/ml，0.156 ng/ml，样品稀释液直接作为空白孔 0 ng/ml。如配制5 ng/ml 标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）10 ng/ml 的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、样品稀释液：1×20ml。
4、检测稀释液 A：1×10ml。
5、检测稀释液 B：1×10ml。
6、检测溶液 A：1×120 ul/瓶（1:100）。临用前以检测稀释液A 1:100 稀释（如：10 ul检测溶液A / 990 检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100 /孔），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。
7、检测溶液 B：1×120 ul/瓶（1:100）。临用前以检测稀释液B 1:100 稀释。稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。
10、终止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5 张
12、使用说明书：1 份
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