供应人血清白蛋白(HSA)ELISA Kit
本试剂盒仅供体外研究使用!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中HSA含量。
实验原理
本试剂盒应用竞争抑制酶标免疫分析法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被抗体的微孔中同时加入酶标的抗原和待测抗原，被测抗原与酶标记抗原对特异性抗体进行竞争结合。经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。待测标本浓度越高，标记抗原和抗体的结合就越受到抑制，显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关，而与样品中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板：一块（96孔）
2. 标准品：2 瓶，每瓶临用前以0.8 ml 样品稀释液稀释，盖好后静置10 分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ug/mL，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ug/mL，33.3 ug/mL，11.1 ug/mL，3.7 ug/mL，1.23 ug/mL，样品稀释液直接作为标准浓度0 ug/mL，临用前15分钟内配制。如配制33.3 ug/mL标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ug/mL 的上述标准品加入含有1 ml 样品稀释液的Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测溶液 A：2×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A 1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔50ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul 检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
5. 检测稀释液 A：2×10ml/瓶。
6. 底物溶液：1×10ml/瓶。
7. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
8. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
9. 覆膜：1×5 张
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