供应人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA Kit
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中α2-MG 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中α2-MG 水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α2-MG抗原、生物素化的抗人α2-MG 抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α2-MG 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板:一块(96 孔)
2. 标准品(冻干品):2 瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10 分钟以上,
然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/mL,做系列倍比稀释后,分别稀释成100ng/mL,50 ng/mL ,25 ng/mL,12.5 ng/mL,6.25 ng/mL,3.12 ng/mL,1.56 ng/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/mL,临用前15 分钟内配制。
如配制50 ng/mL 标准品:取0.5ml 100 ng/mL的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液 A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液 B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液 A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul 检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液 B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100 稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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