奥林巴斯光学显微镜的相差与 DIC 观察需通过聚光镜与专用光学组件的精准匹配、光路校准及参数优化实现；其光源则按应用场景分为明场 / 透射通用光源与荧光专用光源两大类，以下是详细操作与选型指南。
一、聚光镜操作：相差观察（Phase Contrast）
相差观察奥林巴斯光学显微镜通过聚光镜相差环与物镜相位板配合，将样品相位差转化为明暗对比，适用于活细胞、透明标本等。
操作步骤
准备与光路校准
清洁物镜、聚光镜及载玻片；按柯勒照明流程校准，确保视场与孔径光阑中心对齐、照明均匀。
组件匹配与切换
选择相差物镜（镜身标注 “PH”），转动聚光镜转盘至对应相差环：
4× 物镜：PHL（低倍相差环）
10×/20× 物镜：PH1
40×/60× 物镜：PH2
确保聚光镜与物镜倍数严格匹配，避免光晕或对比度下降。
光阑与对焦
全开孔径光阑以保证对比度；用粗 / 微调焦清晰成像，20×/40× 相差物镜若带矫正环，需根据培养皿厚度微调矫正环至图像最锐利。
进阶优化
若出现中心偏移，通过聚光镜中心调节螺丝微调相差环，使相位板与相差环同轴；观察后将聚光镜转回 BF（明场）位置。
关键要点
必须使用配套相差物镜与聚光镜相差环，否则无法形成有效相差效果。
厚样品或折射率差异大时，可适当缩小视场光阑以减少杂散光。
https://industrial.evidentscientific.com.cn/zh/microscope/opt/
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