样品类型（SAMPLE TYPES）：
标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
样品采集：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA检测试剂盒提供免费检测服务，7个工作日内出实验报告，保质保量完成委托实验，只收取试剂盒的费用，其他辅助试剂全部免费。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人ACE抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人ACE会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ACE抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人ACE抗体与结合在包被抗体上的人ACE结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，ACE浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中ACE的浓度。
操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注：
1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
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人激活素A(ACVA)酶联免疫试剂盒
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Human ACVA (Activin A) ELISA Kit
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人脂联素(ADP/Acrp30)酶联免疫试剂盒
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Human ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit
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人Agouti相关蛋白(AgRP)酶联免疫试剂盒
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Human AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit
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人血管生成素(ANG)酶联免疫试剂盒
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Human ANG (Angiogenin) ELISA Kit
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人促血管生成素1(ANG1)酶联免疫试剂盒
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Human ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit
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人促血管生成素2(ANG2)酶联免疫试剂盒
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Human ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit
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人B细胞活化因子 (BAFF/CD257)酶联免疫试剂盒
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Human BAFF/CD257 (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit
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人脑源性神经因子(BDNF)酶联免疫试剂盒
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Human BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
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人骨成型蛋白2 (BMP-2)酶联免疫试剂盒
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Human BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit
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人骨成型蛋白4 (BMP-4)酶联免疫试剂盒
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Human BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit
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人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶联免疫试剂盒
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Human BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit
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人上皮型钙黏蛋白 (E-Cad)酶联免疫试剂盒
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Human E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit
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人碳酸酐酶IX (CA9)酶联免疫试剂盒
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Human CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit
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898995850
