猪口蹄疫病毒抗体ELISA 检测试剂盒
- 价 格：
面议 /
盒
- 供 应 地：广东省深圳市
- 发布公司：深圳市博奥通科生物制品有限公司
- 产品型号：96T*2
- 品 牌：
- 发布日期：2011/9/8 10:18:50
- 联系人QQ：2608247254
详细说明
【名称】
通 用 名：猪口蹄疫病毒抗体ELISA 检测试剂盒
英 文 名：Foot-and-mouth Disease Virus (ELISA) Antibody Test Kit
【目的】口蹄疫是偶蹄兽的一种急性、热性、高度接触性传染病，由口蹄疫病毒引起，以口腔黏膜、蹄部和乳房等处发生水疱和糜烂为特征。本病传染性极高，感染动物范围比较广泛，常呈大流行性，发病率高，难以控制和消灭，在我国家畜家禽防疫条例中被列为一类传染病。本试剂盒采用固相酶联免疫吸附(ELISA)方法，定性检测猪血清中的猪口蹄疫病特异性IgG 抗体，用于猪口蹄疫病毒感染的辅助诊断或疫苗疗效观察等血清流行病学调查，其检测结果仅供参考。
【原理】本试剂盒是采用纯化的猪口蹄疫病毒O 型抗原包被微孔板，在试验中，加入稀释的待检血清，经温育后，若样品中含有猪口蹄疫病特异性抗体，则将与微孔板上的抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，再加入酶标二抗，与微孔板上的抗原抗体复合物发生特异性结合，再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加入底物液，与酶结合物反应形成蓝色产物，颜色强弱与标本中抗体浓度成正比，加入终止液后用酶标仪630nm 波长测定各反应孔中的OD 值，从而达到快速检测之目的。
【组成】
名称 数 量 规 格
FMDV-O 包被抗原板 2 板 96T/板
FMDV-O 阴性对照血清（绿盖） 1 瓶 1ml/瓶
FMDV-O 阳性对照血清（红盖） 1 瓶 1ml/瓶
标本稀释液 1 瓶 50 ml/瓶
FMDV 酶结合物（黄盖） 1 瓶 24 ml/瓶
25X 洗涤液（白盖） 1 瓶 50ml/瓶
底物 A（红盖） 1 瓶 15ml/瓶
底物 B（黑盖） 1 瓶 15ml/瓶
终止液（白盖） 2 张 15ml/瓶
封板膜 2 袋 1 张/板
干燥剂 2 袋 1 袋/板
【所需仪器】
10μl、100μl、1000μl 移液器及相应加样枪头，8 通道或12 通道移液器（可选），量筒等。37℃避光孵育温箱。微型振荡器。自动洗板机（可选），含有630nm 波长滤光片酶标仪（可选）。
【标本采集】
1. 适用标本类型：猪血清。（请勿使用溶血、混浊或脂血标本。）
2. 标本采集：无菌条件下用一次性注射器取耳静脉血型3—5 ml，置入5 ml 干燥管中，静置、斜放30min，待血清
析出后取0.5ml—1ml 血清、转至1.5ml 洁净的EP 管中，待检。
【保存和运输】标本可立即用于测试， 2-8℃保存下不应超过24 小时； -70℃以下长期保存。避免反复冻融。标本运送时应采用0℃冰壶。
【使用方法】
1．使用前准备(试剂盒需平衡至室温)
1.1 洗涤液准备：将25X 洗涤液稀释成1X 洗涤液备用（1 瓶100ml 25X 洗涤液加2400ml 蒸馏水混合）。
1.2 稀释血清：待测血清（冻存标本应平衡至室温并充分混匀）用标本稀释液按1：40 稀释，即取10μl 血清与390μl标本稀释液混合。
2．加样：取出FMDV 包被抗原板，记录阳性对照（2 孔）、阴性对照（2 孔）、空白对照（2 孔）及待检标本,加入100μlFMDV 阴性对照血清（绿盖）、FMDV 阳性对照血清（红盖）、空白对照孔（只加标本稀释液）及已稀释待检标本于相应孔中。用封板膜盖好反应板，37℃避光孵育30 分钟。
3．洗板: 小心去掉封板膜，甩尽板中液体，向每孔中加300μl 1X 洗涤液，静置3 分钟，拍干。重复3 次，每次均需拍干。（或应用自动洗板机洗版）。
4．加酶结合物：每孔加FMDV 酶结合物100μl，盖好反应板，置37℃避光孵育30 分钟。
5．洗板： 重复操作步骤 3。
6．显色：分别向每孔中加底物A（红盖）、底物B（黑盖）各50μl，混匀，37℃避光孵育10 分钟。
7．终止：分别向每孔中加终止液（白盖）50μl，10 分钟内于630nm 波长酶标仪读板。
【质控标准】试验成立的条件是阳性对照孔平均OD 值大于或等于0.8，阴性对照孔平均OD630 值必须小于0.2。
【结果分析判定】
1.肉眼判定
“++++”深度蓝色，液体不透光；“+++”蓝色，液体微透光；“++”中度蓝色，液体透光；“+”浅蓝色，液体透明；“-”无色，液体完全透明。以显色“++”以上判为阳性。
2．酶标仪判定
以空白孔调零，在酶标仪上测各孔 OD630 值。若样品 OD630 值大于或等于0.42 判为阳性；若样品 OD630 值在0.38 到0.42 之间，判为可疑；建议重复检测，重复检测结果仍在0.38 到0.42 判为阳性；样品 OD630 值小于0.38，判为阴性。
【注意事项】
1、使用前请仔细阅读说明书。并且严格按照说明书进行操作。
2、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
3、所有使用的离心管、 Tip 头应高压灭菌。试剂盒里所有物品应视为污染物对待。并按照《微生物生物医学实验
室生物安全通则》进行处理。
4、试剂盒用之前需平衡室温，各试剂盒之间不可混用。
5、洗涤时，每次需停留3 分钟后甩去孔内液体，禁用自来水等其它水源。
6、为提高试验的可比性建议使用仪器判读结果，且检测前避免反应孔里面有气泡产生。
【贮藏、规格及有效期】2 板×96T /板。2~8℃保存，有效期6 个月。
深圳博奥通科生物制品有限公司是一家产学研相结合、科工贸一体化的，集临床、食品安全及动物防疫检验试剂的研发、生产、销售及技术服务为一体的中国大型生物医药高科技企业，隶属于深圳市南山区高新技术产业园。公司目前有近 20 余位博士、硕士、留学归国人员，技术力量雄厚。
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