快速荧光PCR
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- 发布日期：2020/2/21 10:57:40
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详细说明
快速荧光PCR是目前特异性和灵敏度较高的检测技术。PCR技术实际上是一种分子生物学技术，通过放大特定的DNA或RNA（也可看作体外的特殊DNA复制），能快速得到患者体内病毒或细菌的含量，为疾病的诊断和治疗及疗效动态评估提供了有力的参考依据。它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。
原理：
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时,探针结合在DNA任意一条单链上；PCR扩增时，Taq酶的5'端-3'端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。或者使用荧光染料。可以结合到双链DNA上面，当体系中的模板被扩增时，可以有效结合到新合成的双链上面，随着PCR的进行，结合的染料越来越多，被仪器检测到的荧光信号越来越强，从而达到定量的目的。
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