1、 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。
2、 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为10ng/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入500μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成10ng/mL，5ng/mL，2.5ng/mL，1.25ng/mL，0.625ng/mL，0.312ng/mL，0.156ng/mL，标准品稀释液(0ng/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3、 检测稀释液A及检测稀释液B：用6mL蒸馏水或去离子水将6mL浓检测液A及B稀释至12mL，进行2倍稀释，稀释后的工作液不宜进行冷冻保存。（考虑到实验过程中的试剂损失，试剂瓶中稀释液的量多于6ml，因此在每次实验中，必须用移液器准确吸取实验所需量，并在新的容器中进行倍比稀释。）
4、 检测溶液A及检测溶液B：Detection A 及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液A或B1:100稀释(如：10μL检测溶液A/990μL检测稀释液A)，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
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