2015/10/22 19:41:48 来源： 上海笃玛生物科技有限公司
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上海笃玛生物科技有限公司代理的品牌：试剂：Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche
生物试剂及耗材：R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等
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我司专业专利生产ELISA试剂盒，抗体，标准品等，以下是ELISA试剂盒一些常见问题总结：
显色弱、灵敏度 低
实验结束后，包括阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。
1.试剂盒超过期， 超过有效期的产品可能会产生很弱的信号； 试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响
2.试剂、样品用前未平衡至室温
3.加入试剂的体积和时间有误， 移 液器计量不准，吸嘴内水分太多或不清洁
4.洗板及加样过程中，酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力
5.孵育时间及孵育温度未达到要求 ，反应板放入培养箱时注意温度并及时调整
6.洗板次数过多，或浓缩洗液稀释倍数不符合要求；洗涤冲击力太大。浸泡时间太长
7.显色剂加量不足或顺序颠倒，或混合后加入
8.底物作用时间不够
9.蒸馏水水质有问题
对策：
1.实验前检查试剂的组分及批号，确认试剂未过期。 不要将试剂盒长时间置于常温下，按使用规定储藏。
2.从低温冰箱中取出的试剂及样品应置室温平衡 20分钟左右。
3.确定所使用的试剂体积正确，加入时间适当。 校正移液器，移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快，排放应完全
4.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净，确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染
5.孵育温度应控制在 37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。 保温期内不宜多开门，以免影响保温
6.严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板，减小洗涤冲击力，按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数
7.显色剂滴瓶垂直向下，持力均匀，滴速不宜过快，先加显色剂?A，后加显色剂B，不可将A、B液混合后加入
8.准确定时
9.测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响
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