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笃玛生物关注:石蜡切片及染色过程

2015/9/12 11:20:48 来源: 上海笃玛生物科技有限公司

石蜡切片及染色过程

 来源:丁香园论坛


石蜡切片及HE染色过程

一、 石蜡切片

1.  取材: 刀片要求锋利而薄,组织厚度约2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2~0.3cm为宜. 取材时间越快越好.

2.  固定: 组织取下后应立即放入10%福尔马林(相当于4%甲醛)固定.

注意:

(1). 固定液量应为组织块体积的40倍.

(2) 固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小, 温度等有关. 一般为3—24h.
(3)固定温度大多可在室温固定, 在低温(4℃)时间应延长.
(4)固定容器应大些.
3.  漂洗: 流水冲洗2—10h.
4.  脱水: 从低浓度酒精到高浓度酒精.
70%(数分钟)→80%(60-120’)→90%(60-120’)→95%(60-120’)→95%(60-120’)→100%(60-120’)→100%(60-120’).
5.  透明: 组织块脱水后必须经过一种既能与酒精混合又能溶解石蜡的溶剂, 而使石蜡进入组织块. 常用二甲苯, 一般浸泡30m即可.
6.  浸蜡: 组织经透明后在熔化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡. 一般需经2—3次浸渍才能完成, 总时间为3—4h. 用于浸蜡的石蜡熔点为52—56℃.
7.  包埋: 先将熔化的石蜡倒入包埋框再用加热的镊子将组织块放入. 包埋面必须平整. 包埋后石蜡稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.
8.  切片: 修块→切片→展片→捞片→烤片.

二、 HE染色

1.  染色前切片处理
(1)  脱福尔马林色素.
(2)  脱汞盐结晶.
(3)  脱黑色素.

2. 染色步骤

二 甲苯脱蜡(10’)→ 无水乙醇洗去二甲苯(1’×2次)→95%酒精(1’)→90%酒精(1’)→85%酒精(1’)→自来水洗(2’)→苏木精染色(1—5’)→自来水洗 (1’)→1%盐酸酒精分化20s→自来水洗(1’)→稀氨水(1%)反蓝30s→自来水或蒸馏水洗(1’)→伊红染色(20s—5min)→自来水洗 (30s)→85%酒精脱水(20s)→90%酒精脱水(30s)→95%酒精(1’)→95%酒精(1’)→100%酒精(2’)→100%酒精 (2’)→二甲苯(2’)→中性树胶封片.

3.   染色结果: 细胞核呈兰色, 胞浆呈红色.

三、 盐酸酒精的配制

浓盐酸0.5—1ml + 75%酒精99ml.

此液用一段时间后需延长或更换液体, 新液体分化时间要短.

 供应产品信息

DM01573 人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)ELISA试剂盒 96T/48T
DM00473 人循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01574 人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01575 人血管抑素/血管稳定蛋白(angiostatin)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01576 人纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01577 人血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01578 人狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01579 人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01580 人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01581 人apelin 12(AP12)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01582 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 96T/48T
DM00425 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01583 人肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01584 人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒 96T/48T
DM00394 人过敏毒素/补体片断4(C4a)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01585 人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01586 人补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01587 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01588 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01589 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01590 人心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01591 人脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01592 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01593 人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01594 人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 96T/48T
DM00395 人载脂蛋白A4(ApoA4)ELISA检测试剂盒 96T/48T
DM01595 人抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01596 人凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01597 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01598 人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01599 人前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01600 人大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01601 人肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒 96T/48T
DM01602 人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 96T/48T


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