2016/4/18 16:26:14 来源： 上海笃玛生物科技有限公司
--上海笃玛生物科技有限公司
ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我公司将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期提高试验质量。
Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法
1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。
2 加样 可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育 可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板 可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 显色 可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。
上海笃玛生物科技有限公司ELISA促销产品：
| 人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫试剂盒 | Human TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit |
| 人转化生长因子β1(TGF-β1)酶联免疫试剂盒 | Human TGF-β1 (Transforming Growth Factor Beta 1) ELISA Kit |
| 人血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)酶联免疫试剂盒 | Human VEGF-A (Vascular Endothelial Cell Growth Factor A ) ELISA Kit |
| 人表皮调节素(EREG)酶联免疫试剂盒 | Human EREG (Epiregulin) ELISA Kit |
| 人瘦素(LEP)酶联免疫试剂盒 | Human LEP (Leptin) ELISA Kit |
| 人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)酶联免疫试剂盒 | Human Bcl-2 (B-cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit |
| 人尿微量白蛋白(MAU)酶联免疫试剂盒 | Human MAU (Microalbuminuria) ELISA Kit |
| 人促黄体生成激素(LH)酶联免疫试剂盒 | Human LH (Luteinizing Hormone) ELISA Kit |
| 人肾素(REN)酶联免疫试剂盒 | Human REN (Renin) ELISA Kit |
| 人组织蛋白酶C(CTSC)酶联免疫试剂盒 | Human CTSC (Cathepsin C) ELISA Kit |
| 人C-肽(C-P)酶联免疫试剂盒 | Human C-P (C-Peptide) ELISA Kit |
| 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶联免疫试剂盒 | Human OxLDL (Oxidized Low Density Lipoprotein) ELISA Kit |
| 人载脂蛋白A1(ApoA1)酶联免疫试剂盒 | Human ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit |
--上海笃玛生物科技有限公司
898995850
