四环素类药物检测试剂盒
四环素类药物检测试剂盒
一、产品概要
四环素类药物(Tetracyclines，TCs)是以四并苯为母核的一族抗生素，在畜牧业生产中广泛用于疾病的治疗和预防及促进生长。但该类药物过量使用会导致畜产品中高浓度药物残留，直接影响消费者身体健康。高效液相色谱法目前是分析四环素类药物残留量的主要方法，但需要一系列繁琐的提取和净化处理步骤，而且存在回收率低，杂质干扰大等问题。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试剂原理
四环素检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的四环素类药物（Tetracyclines，Tc），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的四环素类药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗四环素类药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含四环素类药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中四环素类药物的残留量。
三、适用范围
四环素检测试剂盒可定量、定性检测组织样本中四环素的药残留量。
四、技术指标
1 试剂盒灵敏度：0.05ppb(ng/ml)
2 反应模式：37℃，30min～30min～15min。
3 检测下限：
组织样本（鸡、鸭、猪肉/肝、虾、鱼、鸡蛋）：0.3ppb
蜂蜜样本：2ppb
4 样本回收率：
组织（鸡、鸭、猪肉/肝、虾、鱼）...85±20%
蜂 蜜.........................75±20%
五、试剂盒组成
酶标板、标准液（6个）、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液
六、贮藏条件及保存期
储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，不要冷冻。
保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。
操作步骤
一、样本前处理
产品适用于组织、肝脏、蜂蜜、鸡蛋、尿样等样本检测，具体处理方法参见相应说明书。
二、酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上。
1 编 号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2 加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗体工作液50µl/孔，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，37℃反应30分钟。
3 洗 涤：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用工作洗涤液250µl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。
4 加酶反应：每孔加入酶标记物100µl，盖板膜盖板后置37℃
环境中反应30min。
5 洗 涤：同3
6 显 色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光显色15分钟。
7 终 止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。
8 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应终止反应后在10分钟内完成。
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