
专业供应单项压力封闭剂
单向压力封闭剂是否必要,取决于Elisa的模式及具体的实验条件。并非所有的Elisa固相均需单向压力封闭剂,单向压力封闭剂不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经单向压力封闭剂也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似单向压力封闭剂剂的作用。但在间接法测定中,单向压力封闭剂一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。1.2酶联物(结合物)
结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要有良好的稳定性。
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钻井液用单项压力封闭剂(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。抗原或抗体包被时所用的浓度较低,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙,钻井液用单项压力封闭剂就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥在Elisa其后的步骤中干扰物质的再吸附。单向压力封闭剂的手续与包被相类似。最常用的单向压力封闭剂剂是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为单向压力封闭剂剂的。脱脂奶粉也是一种良好的单向压力封闭剂剂,其最大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作单向压力封闭剂剂使用,但由于奶粉的成份复杂,而且单向压力封闭剂后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。
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