STI501蜂蜜中羟甲基糠醛含量检测高效液相色谱仪_蜂蜜羟甲基糠醛检

GB/T  6682-1992
蜂蜜中羟甲基糠醛含量的液相色谱测定方法，检出限1.0mg/kg，蜂蜜样品中的羟甲基糠醛经HPLC反相色谱柱分离，用液相色谱仪紫外检测器检测，通过色谱软件来收集图谱、查看标准曲线外标法定量。本方法使用我公司STI501系列高效液相色谱仪系统来检测，检测精度满足GB/T6682-1992要求。

1检测条件
      1.1甲醇:色谱纯。
      1.2甲醇溶液:10%,吸取100ml,的甲醇到1000  ML的容量瓶中，用水稀释至刻度。
      1.3标准物质:羟甲基糠醛纯度≥99%,
      1.4标准储备溶液:准确称取适量的羟甲基糠醛标准物质于100mL容量瓶，用10ml,甲醇溶解，用水稀释至刻度，配成0.20mg/mL的标准储备液。此溶液可在温度低于4℃冰箱中冷藏保存两个月。
1.5标准工作溶液:分别吸取适量的羟甲基糠醛标准储备溶液至100mL容量瓶中，用10%甲醇溶液释稀至刻度，配成0.10ug/mL，0.20ug/mL，1.0ug/mL，2.0ug/mL，4.0ug/mL，6.0ug/mL，10ug/ml,标准工作溶液

      2仪器
2.1501高效液相色谱仪（杭州赛析科技）:配全波长紫外检测器。
    恒流泵：耐压42Mpa，流速精度0.001ml/min
    内置式专用色谱软件，可做外标法，能兼容XP操作系统，RS-232接口
      2.2分析天平:感量0.01g,
      2.3注射器:10mL，微量进样器
2.4过滤膜:0.45um，一次性针式过滤器
2.5  XO-80超声波清洗器、FB-10T溶剂过滤器、AP-01真空泵
2.6色谱柱温箱

      3试样制备与保存
      3.1试样的制备
              无论有无结晶的实验室样品，都不要加热。将其搅拌均匀，分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。
      3.2试样的保存
              将试样于室温下保存。

      4测定步骤
      4.1试样处理
              称取10g试样，精确至0.01g，置于100mL烧杯中，加人10mL甲醇(1.2)，用玻璃棒轻轻搅拌均匀，使试样完全溶解。转移至l00mL容量瓶中，用水释稀至刻度，充分混匀。用0.45u  m的滤膜过滤，滤液用于液相色谱仪紫外检测器测定。
      4.2色谱侧定
      4.3液相色谱条件
              a)色谱柱:Vertex  C18  5um,250mmX4.6  mm（i.d  )或相当者（美国进口）;
              b)流动相:甲醇+水(10十90);
              c)流速:1.0  m  L/min;
              d)检测波长:285n  m;
              e)柱温:30度
              f)进样量:10uL.
      4.4液相色谱测定
              首先测定七个标准工作溶液(1.5)在上述色谱条件下的峰面积，以峰面积对相应浓度绘制标准工作曲线，然后测定未知样品，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中羟甲基糠醛的响应值应在仪器的线性范围内。在上述色谱条件下，羟甲基糠醛的参考保留时间约为12  min。羟甲基糠醛标准物质色谱图和含有短甲基糠醛的蜂蜜样品色谱图参见附录A中图A.1、图A.2  ,
      4.5平行试验
              按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。
      4.6空白试验
              按上述步骤，对10%的甲醇溶液进行测定。
      4.7添加试验
              每批样品应至少进行一个样品的添加试验。称取10g试样，精确至0.0lg，添加1.0mL羟甲基糠醛标准储备溶液，加9.9mL甲醇溶解，其他步骤按试样处理步骤进行。

      5精度
            本部分的精密度数据是按照GB/T6379的规定确定的，其重复性和再现性的值是以95%的可信度来计算。
      本方法中经甲基糠醛添加浓度及其回收率的试验数据:
      在添加量为1.0mg/kg时，平均回收率为93.78%;
      在添加量为10.0mg/kg时，平均回收率为94.88%;
      在添加量为40.0mg/kg时，平均回收率为95.76%;
      在添加量为100mg/kg时，平均回收率为94.68%.

STI501蜂蜜中羟甲基糠醛含量检测高效液相色谱仪

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