人巨噬细胞炎性蛋白4α(MIP4α)ELISA试剂盒

本试剂盒供研究使用。

检测范围:

15ng/L -480ng/L

使用目的:

本试剂盒用于测定人血情，血很及相关液体样本中白细胞介素-4(IL-4)含量:

实验原理

本试剂盒应用双抗伴夹心法测定标本中人自细胞介票4(IL-4)水竿。用纯化的人白细胞介素-4〈IL-4)抗体包被微孔袋，制成国相抗伴，往包被单扰的微孔中依次加

入白细胞介素-4(IL-4)，再与HRP标记的白细胞介素-4(IL-4)抗体结合，形成抗体-抗原-解标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色，TMB在HRP解的催化下转

化成蓝色，并左酿的作用下转化成黄色，颜色的源淡和样晶中的白细胞介素-4(IL-4)呈正相关。用解标仪在450mm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计

算样品中人白细胞介素-4(IL-4)浓压。

标本要求

1.标本来集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样晶孔。在酵标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中

先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品稀释团为5倍)。加样将样品加于酵标板孔廉部，尽量不触及孔壁，粒粒晃助混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟，

4. 配液:将30倍浓罐洗源液用蒸馏水30倍精释后备用

5. 洗涤:小心拇掉封板膜，弃去液体，甩子，每孔加情洗涤液，静置30秒后奔去，如此重复5次，拍干。

6. 加呼:每孔加入解标试剂50μ，空白孔除外。

7. 温育:操作同3.

8. 洗涤:操作同5.

9. 显色:每扎先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，粒粒展落混匀，37℃避光显色10分钟.

10. 终止:每孔加終止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)，

11. 测定:以空白孔调零:450nm波长限序测量要孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人巨噬细胞炎性蛋白4α(MIP4α)ELISA试剂盒

计算

        以标准物的浓度为横坐标，OD值为职坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线鉴出相应的浓度;再乘以稀释倍敷;或用标准物的浓度与OD值

计算出标准曲线的置线回旧方模式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓质，再缩以稀释倍数，即为样品的实际浓质，

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在压温平衡15-30分钟后方可使用，解标包被板开封后如未用充，板条应装入密封筑中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶桥出，稀荐时可在水浴中加温动漆，洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验诱楚，一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样，

4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本0D值大于标准品孔的OD值)，请先用样品税释液税释一定信数(n倍)后再测定，

计算时请乘以总稀释倍数(xnx5)。

5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6.底物请避光侠存。

7。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以而标仪添数为准,

3.所有样品，洗涤液和各种废奔物都应接传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得流用。

保存条件及保存期

1.试剂盒保存::2-8℃.

2.保存期:6个月