细胞名称 人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM]
形态特性 圆形的并能折光的
生长特性 半贴壁生长
特征特性 这株细胞CEA、CSAp和结肠抗原3呈阴性。 角蛋白和波形纖維蛋白呈弱阳性
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM]传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM]使用权限 A类
应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37~37.5℃,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
1000g离心5min,弃上清,加入1ml新鲜完全培养基重悬细胞。
在无菌台内取适量完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
培养细胞状态欠佳原因分析
1、 培养基的新鲜程度:一般加入血清后的完全培养基,最好2周内用完。否则血清有效成分失活,影响细胞培养。
建议:完全培养基一次不要配太多,200ml以下。或根据用量决定。
2、 细胞外源微生物的污染:细胞不宜长期体外培养,因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的。影响细胞状态。
建议:实验前冻存一批细胞,隔几个月重新复苏。即保证实验所用细胞代数一致,又将外源污染的后果降到最低。
3、 排除其他原因:如更换培养条件(血清、培养基等);使用器皿的洁净程度;