细胞名称 人前列腺癌细胞;VCaP
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1997从一位不受激素影响的前列腺癌患者脊椎转移灶中建立了这株细胞。先在小鼠中进行异种移植传代,随后进行体外培养。体内及体外都对雄性激素敏感。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
人前列腺癌细胞;VCaP传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(39+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11,12;D16S539:9;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:31;D2S1338:17,25;D3S1358:14,15;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:12,13;FGA:21,26;TH01:9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19
同工酶
人前列腺癌细胞;VCaP染色体
使用权限 A类
应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37~37.5℃,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
1000g离心5min,弃上清,加入1ml新鲜完全培养基重悬细胞。
在无菌台内取适量完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
培养细胞状态欠佳原因分析
1、 培养基的新鲜程度:一般加入血清后的完全培养基,最好2周内用完。否则血清有效成分失活,影响细胞培养。
建议:完全培养基一次不要配太多,200ml以下。或根据用量决定。
2、 细胞外源微生物的污染:细胞不宜长期体外培养,因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的。影响细胞状态。
建议:实验前冻存一批细胞,隔几个月重新复苏。即保证实验所用细胞代数一致,又将外源污染的后果降到最低。
3、 排除其他原因:如更换培养条件(血清、培养基等);使用器皿的洁净程度;