细胞名称 人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)
形态特性 神经母细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1972年11月从一们多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 有报道称SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1x106细胞/平方厘米。细胞形态多样,有的有长突触,有的呈上皮细胞样。 细胞会聚集,形成团块并浮起。
人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(36+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:14,16;D19S433:12,13;D21S11:30,31,32.2;D2S1338:17,23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18
同工酶
人神经母细胞瘤细胞;SK-N-BE(2)染色体
使用权限 A类
应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37~37.5℃,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
1000g离心5min,弃上清,加入1ml新鲜完全培养基重悬细胞。
在无菌台内取适量完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
培养细胞状态欠佳原因分析
1、 培养基的新鲜程度:一般加入血清后的完全培养基,最好2周内用完。否则血清有效成分失活,影响细胞培养。
建议:完全培养基一次不要配太多,200ml以下。或根据用量决定。
2、 细胞外源微生物的污染:细胞不宜长期体外培养,因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的。影响细胞状态。
建议:实验前冻存一批细胞,隔几个月重新复苏。即保证实验所用细胞代数一致,又将外源污染的后果降到最低。
3、 排除其他原因:如更换培养条件(血清、培养基等);使用器皿的洁净程度;