细胞名称 人红白血病细胞;Kasumi-1
形态特性 原粒细胞
生长特性 悬浮生长
特征特性 这是一个带有8:21号染色体转位的白血病细胞株。 这个转位使得AML1基因和ETO (或称 MTG8)基因串联,使融合基因AML1-ETO (也称作 AML1-MTG或 RUNX1-CBF2T1)的表达升高,因而细胞产生嵌合的AML1-ETO蛋白。 这个蛋白下调CEBPA mRNA,蛋白和DNA的结合活性,而这种结合对粒性白细胞的分化是极端重要的。 这株细胞建立于一位急性白血病患者的外周血。 这株细胞髓过氧化物酶阳性,显示其髓性成熟的形态。 增生试验显示,培养的细胞对IL-3、IL-6、G-CSF(粒细胞
人红白血病细胞;Kasumi-1培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,20%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
人红白血病细胞;Kasumi-1染色体
使用权限 A类
应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37~37.5℃,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
1000g离心5min,弃上清,加入1ml新鲜完全培养基重悬细胞。
在无菌台内取适量完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
培养细胞状态欠佳原因分析
1、 培养基的新鲜程度:一般加入血清后的完全培养基,最好2周内用完。否则血清有效成分失活,影响细胞培养。
建议:完全培养基一次不要配太多,200ml以下。或根据用量决定。
2、 细胞外源微生物的污染:细胞不宜长期体外培养,因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的。影响细胞状态。
建议:实验前冻存一批细胞,隔几个月重新复苏。即保证实验所用细胞代数一致,又将外源污染的后果降到最低。
3、 排除其他原因:如更换培养条件(血清、培养基等);使用器皿的洁净程度;