细胞名称 人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 NCI-H460细胞株从一位大细胞肺癌患者的胸水中建立。 细胞表达的p53 mRNA易于检测,其水平与正常肺细胞相当,未表现出DNA总体结构异常。 角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性,神经丝三联体蛋白阴性。
人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(139+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:13;D16S539:9;D18S51:13,15;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:15,18;D5S818:9,10;D7S820:9,12;D8S1179:12;FGA:21,23;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17
人大细胞肺癌细胞;NCI-H460 [H460]同工酶
染色体
使用权限 A类
应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37~37.5℃,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
1000g离心5min,弃上清,加入1ml新鲜完全培养基重悬细胞。
在无菌台内取适量完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。
培养细胞状态欠佳原因分析
1、 培养基的新鲜程度:一般加入血清后的完全培养基,最好2周内用完。否则血清有效成分失活,影响细胞培养。
建议:完全培养基一次不要配太多,200ml以下。或根据用量决定。
2、 细胞外源微生物的污染:细胞不宜长期体外培养,因为外源微生物污染的几率大大提高。易发现和难发现的。影响细胞状态。
建议:实验前冻存一批细胞,隔几个月重新复苏。即保证实验所用细胞代数一致,又将外源污染的后果降到最低。
3、 排除其他原因:如更换培养条件(血清、培养基等);使用器皿的洁净程度;